您好,歡迎來到上海撫生實業有限公司!
400-990-7709(工作日9:00-18:00)
乙醇酸氧化酶測試盒(比色法)
AS6321395
貨號 規格 目錄價 會員價 庫存 數量 購買
AS6321395-100管/96樣 100管/96樣 ¥1080.00 登錄查看
AS6321395-50管/48樣 50管/48樣 ¥560.00 登錄查看

乙醇酸氧化酶(glycollic oxidase, GO)試劑盒說明書

                                                微量法 100T/96S

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.1)是植物光呼吸代謝中的關鍵酶,也是光下合成草酸的關鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對研究光呼吸代謝過程及其調控具有重要意義。

測定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

試劑組成和配制

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加5mL雙蒸水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑三:液體2mL×1支,4℃保存。

酶液提取

按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。12000g, 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定操作表

 

測定管

樣本(μL)

10

試劑一(μL)

130

試劑二(μL)

40

試劑三(μL)

20

充分混勻,立即于微量石英比色皿/96孔板中測定324nm處10s和190s吸光值A1和A2,△A=A2- A1

酶活性計算公式

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1.按照蛋白濃度計算

酶活性定義每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個酶活力單位。

GO活性(nmol/min /mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 392×△A÷Cpr

2.按照樣本質量計算

酶活性定義每克組織每分鐘氧化1 nmol乙醇酸所需的酶量為一個酶活力單位。

GO活性(nmol/min /g 鮮重)= ×V反總÷(V樣×W÷V樣總)÷T= 392×△A÷W

ε:乙醛酸苯腙毫摩爾消光系數:17L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.01mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質量,g;T:反應時間,3min

b. 用96孔板測定的計算公式如下

1.按照蛋白濃度計算

酶活性定義每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個酶活力單位。

GO活性(nmol/min /mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 784×△A÷Cpr

2.按照樣本質量計算

酶活性定義每克組織每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個酶活力單位。

GO活性(nmol/min /g 鮮重)= ×V反總÷(V樣×W÷V樣總)÷T= 784×△A÷W

ε:乙醛酸苯腙毫摩爾消光系數:17L/mmol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.01mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質量,g;T:反應時間,3min

 

 

相關產品
果膠甲酯化程度測試盒(比色法)
產品編號:AS6321399 規格:100管/96樣
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒(比色法)
產品編號:AS6321403 規格:100管/48樣
果膠裂解酶測試盒(比色法)
產品編號:AS6321401 規格:100管/48樣
果膠酶測試盒(比色法)
產品編號:AS6321400 規格:100管/48樣
半乳糖醛酸含量測試盒(比色法)
產品編號:AS6321398 規格:100管/96樣
原果膠含量測試盒(比色法)
產品編號:AS6321397 規格:100管/48樣
共價結合型果膠(CSP)含量測試盒(比色法)
產品編號:AS6321396 規格:100管/48樣
乙醇酸氧化酶測試盒(比色法)
產品編號:AS6321395 規格:100管/96樣
二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒(比色法)
產品編號:AS6321388 規格:100管/96樣
植物葉綠素(chlorophyll)含量測試盒(比色法)
產品編號:AS6321385 規格:100管/96樣
精品高跟丝袜AV专区_国产交换配乱婬视频偷最新章节_欧美精品久久天天躁_日本在线一区二区三区不卡